Reinforced Clostridia Medium (RCM) - Definisi, Komposisi, Cara Pembuatan dan Interpretasi Medium

Reinforced Clostridia Medium atau disingkat RCM adalah medium yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri anaerob. Medium ini ditemukan oleh Hirsch dan Grinstead yang digunakan untuk enumerasi koloni bakteri Clostridia.  Selain itu medium ini juga dapat digunakan sebagai media enumerasi koloni bakteri anaerob.

{tocify} $title={Daftar isi}

A. Prinsip dan Kegunaan Reinforced Clostridia Medium

Reinforced Clostridia Medium memiliki sifat fisik semi solid dengan kandungan nutrisi yang tinggi. Kandungan nutrisi yang tinggi dapat mempercepat laju pertumbuhan bakteri anaerob. Selain itu RCM juga dapat digunakan sebagai medium isolasi dan enumerasi bakteri anaerob dari berbagai sumber seperti dari makanan dan spesimen klinis.

B. Komposisi Reinforced Clostridia Medium

Komposisi Reinforced Clostridia Medium menurut Oxoid adalah sebagai berikut:

Komponen Medium	Jumlah
Yeast Extrac	13 gram
Peptone	10 gram
Glucose	5 gram
Soluble Starch	1 gram
Sodium Chloride	5 gram
Cysteine Hydrochloride	5 gram
Agar	0,5 gram
Distilled Water	1 liter
Final pH	6.8 ± 0.2 @ 25°C

C. Cara Membuat Reinforced Clostridia Medium

1. Formula RCM adalah 38 gram / liter akuades (Oxoid). Jadi untuk membuat 1 liter / 1000 ml medium dibutuhkan sebanyak 38 gram serbuk medium RCM yang dilarutkan kedalam 1 liter akuades.
2. Timbang medium menggunanakan timbangan analitik agar lebih presisi.
3. Larutkan 38 gram medium kedalam 1 liter akuades dengan cara dipanaskan pada suhu 80°C sambil diaduk menggunakan alat hot plate and magnetic stirrer. Pastikan medium larut dengan sempurna dan tidak terjadi penggumpalan.
4. Atur pH medium hingga mencapai 6,2 ± 0.2.
5. Medium yang telah jadi dimasukkan kedalam tabung reaksi / tabung vial sesuai kebutuhan dan tutup dengan tidak rapat / renggang.
6. Sterilisasi medium menggunakan autoklaf pada suhu 121°C dan tekanan 2 Atm selama 15 menit.
7. Setelah disterilisasi dan medium sudah agak digin medium dapat digunakan untuk melakukan kegiatan isolasi / kultivasi. Medium yang tidak digunakan dapat disimpan pada suhu 2 - 8 °C untuk sementara waktu.

D. Interpretsi Pertumbuhan pada RCM

Kontrol Positif	Hasil yang diharapkan
Clostridium perfringens ATCC 13124*	Tumbuh baik yang ditandai keruhnya medium
Kontrol Negatif	Hasil yang diharapkan
Medium yang tidak diinokulasi	Tidak ada perubahan

E. Sumber & Referensi

• Hirsch A. and Grinstead E. (1954) J. Dairy Res. 21. 101-110.
• Oxoid.com

Follow

MicrobeHolic Situs berbagi ilmu Biologi dan Mikrobiologi. Silahkan follow situs ini untuk mendapatkan update terbaru.

Share this post